Última actualização em 5 de Maio de 2020 por Sagar Aryal
Para que serve o teste de Biureto?
Proteínas são o composto complexo formado por milhares de aminoácidos. Os aminoácidos são electrólitos anfotéricos com grupos carboxil e aminoácidos que actuam como ácido e base. Tem uma carga positiva e uma carga negativa, pelo que estes iões são electricamente neutros e não migram no campo eléctrico. Os dois aminoácidos estão ligados com a ajuda de uma ligação chamada ligação peptídeo e produz dipeptídio. A ligação é formada entre o grupo aminoácido α de um aminoácido e o grupo carboxil α de outro aminoácido com a remoção de uma molécula de água. A formação da ligação do peptídeo é referida como a reacção de condensação. Da mesma forma, três aminoácidos ligados entre si por duas ligações de peptídeos são chamados de tripeptídeo, e à medida que a cadeia se prolonga, é chamado de polipéptido. O biureto é um composto formado pelo aquecimento da ureia a 1800, que resulta na condensação de 2 moléculas de ureia. As ligações do peptídeo no Biureto dão um resultado positivo para o teste, daí o nome do reagente. É considerado como um teste geral para compostos (proteínas e péptidos) com duas ou mais ligações peptídeas (CO-NH).
Objectivos
- Detectar a proteína na solução dada.
- para demonstrar a presença da ligação do peptídeo.
Princípio do teste de biureto (Como funciona o teste de biureto?)
Um teste de biureto é um teste químico utilizado para determinar a presença de uma ligação do peptídeo numa substância. Baseia-se na reacção de biureto na qual uma estrutura de peptídeo contendo pelo menos duas ligações de peptídeo produz uma cor violeta quando tratada com sulfato de cobre alcalino. Na presença de uma solução alcalina, o ião azul de cobre II pode formar um complexo com as ligações do peptídeo, uma vez que o peptídeo tem pares de electrões não partilhados em azoto e oxigénio da água. O complexo de coordenação colorido é formado entre o ião Cu2+ e o oxigénio carbonilo (>C=O) e o azoto amida (=NH) da ligação do peptídeo. Uma vez formado este complexo, a solução passa de azul para púrpura. Quanto mais profunda a cor púrpura, mais elevado é o número de complexos peptídeo-cobre. A reacção ocorre em qualquer composto contendo pelo menos dois grupos de H2N-C, H2N-CH2-, H2N-CS- ou semelhantes unidos directamente ou através de um átomo de carbono ou nitrogénio. Um ião de cobre está provavelmente ligado a 6 ligações de peptídeos próximos através de ligações coordenadas. A intensidade da cor é directamente proporcional ao número de ligações peptídeo presentes na molécula de proteína que está a reagir e também ao número de moléculas de proteína presentes no sistema de reacção.
O reagente Biuret é uma solução composta de hidróxido de sódio (NaOH) ou hidróxido de potássio (KOH), sulfato de cobre hidratado (II), e tartarato de sódio potássico. O hidróxido de sódio e o hidróxido de potássio fornecem o meio alcalino e o tartarato de sódio potássico é adicionado ao quelato e assim estabiliza os iões cúpricos na solução ou para manter a sua solubilidade em solução alcalina.
Biureto Procedimento de ensaio
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li>Adicionar 1-2 ml de reagente de Biureto a todos os tubos de ensaio.
Resultados do teste de Biureto
Observação |
Interpretação |
| Sem mudança de cor, i.e., a solução permanece azul | Proteínas estão ausentes (teste de biureto negativo) |
| A solução passa de azul para roxo profundo | Proteínas estão presentes (teste de biureto positivo) |
Usos do Teste de Biureto
- Pode ser usado para detectar a quantidade de proteína na urina.
- Reacção biureto com proteína é aplicável à determinação quantitativa da proteína total por análise espectrofotométrica.
- Shrestha B (2002). Bioquímica e biotecnologia práticas. Primeira edição. 99933-665-1-X.
- https://study.com/academy/lesson/what-does-biuret-test-for-method-equation.html.
li>Chemistry Learner (https://www.chemistrylearner.com/biuret-test.html).li>Satyanarayana U e Chakrapani U (2006). Bioquímica. Uppala Author-Publisher Interlink. Terceira edição. Página nº. 43-67.
Fontes da Internet
- 2% – https://www.slideshare.net/jammalavamsikrishna/amino-acids-71579203
- 2% – https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/biuret
- 2% – https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0009898175903514
- 2% – https://peptidesciences.com/information/peptide-bonds/
- 10% – https://onlinesciencenotes.com/biuret-test-principle-requirements-procedure-and-result-interpretation/
- 1% – https://quizlet.com/18722031/biology-chapter-5-flash-cards/
- 1% – https://microbiologyinfo.com/benedicts-test-principle-composition-preparation-procedure-and-result-interpretation/
- 1% – https://brainly.in/question/716138
- 1% – http://amrita.olabs.edu.in/?sub=79&brch=17&sim=205&cnt=1
- <https://education.jlab.org/qa/charges_01.html