Płytka odłamkowa
- Procedura
Jak wspomniano w poprzednim laboratorium, czyste kultury są niezbędne w badaniach mikrobiologicznych. Uzyskanie czystej kultury bakterii jest zwykle osiągane przez rozprowadzenie bakterii na powierzchni stałego podłoża tak, aby pojedyncza komórka zajmowała izolowaną część powierzchni agaru. Ta pojedyncza komórka będzie się wielokrotnie rozmnażać, aby uzyskać widoczną kolonię podobnych komórek lub klonów. Istnieją trzy metody powszechnie stosowane w celu uzyskania czystej kultury:
- Płytka posiewowa – oryginalna kultura jest seryjnie rozcieńczana i niewielka objętość końcowego rozcieńczenia jest rozprowadzana na powierzchni płytki agarowej.
- Płytka polewowa – oryginalna kultura jest seryjnie rozcieńczana i niewielka objętość końcowego rozcieńczenia jest dodawana do roztopionego agaru, który jest wylewany na płytkę agarową i pozostawiony do stwardnienia. Kolonie rozwijają się podpowierzchniowo.
- Płytka do posiewu – oryginalna hodowla jest bezpośrednio rozcieńczana na powierzchni agaru przy użyciu pętli inokulacyjnej. Jest to prosta & szybka metoda.
Wszystkie te metody rozcieńczają lub „rozrzedzają” ciężką populację bakterii na powierzchni agaru. Technika posiewu na płytki była używana w laboratorium #5 do uzyskania izolowanych kolonii. W tym laboratorium nauczymy się posypywać płytkę z mieszaną kulturą zawierającą więcej niż jeden gatunek bakterii. Ponieważ większość próbek bakteryjnych, z którymi styka się mikrobiolog (w klinice, środowisku, przemyśle, itp.) to kultury mieszane, jest to bardzo ważna technika mikrobiologiczna. Jeśli procedura ta zostanie wykonana prawidłowo, wyrośnie pewna liczba wyizolowanych kolonii, które będą źródłem czystych kultur bakteryjnych.
Płytka do posiewu – Triplet Streak. Istnieje wiele odmian techniki posiewu, ale w tym laboratorium użyjemy potrójnego posiewu, jak opisano tutaj. Przed rozpoczęciem pracy z płytką do posiewu należy zapoznać się z diagramami i opisem techniki na następnej stronie.