Analiza płynu mózgowo-rdzeniowego jest ważnym narzędziem diagnostycznym w badaniu pacjentów neurologicznych, ale ma swoje ograniczenia. Liczba komórek i poziom białka w płynie mózgowo-rdzeniowym mogą być uważane za analog CNS CBC i poziomu białka w surowicy. Nieprawidłowości w zabarwieniu, komórkowości i poziomie białka płynu mózgowo-rdzeniowego silnie wskazują na chorobę neurologiczną i często przyczyniają się do postawienia diagnozy, ale są niespecyficzne i tylko w sporadycznych przypadkach pozwalają na postawienie ostatecznej diagnozy. Choroby OUN również nie zawsze powodują zmiany w płynie mózgowo-rdzeniowym – nieprawidłowości zależą od lokalizacji i rozległości zmiany. Wcześniejsze leczenie kortykosteroidami może zaburzać obraz płynu mózgowo-rdzeniowego i zmniejszać liczbę białych krwinek oraz odsetek neutrofili. Płyn mózgowo-rdzeniowy powinien być przetworzony (lub zakonserwowany) w ciągu 30 minut po pobraniu, ponieważ komórki ulegają szybkiej degradacji z powodu małej zawartości białka.
Pobranie płynu mózgowo-rdzeniowego powinno być wykonane przed mielografią, ponieważ środki kontrastowe mogą wywołać podrażnienie opon mózgowych i zmienić charakter płynu poprzez wywołanie odpowiedzi zapalnej. Zmiany mogą wpływać na analizę płynu mózgowo-rdzeniowego przez co najmniej trzy do pięciu dni po mielogramie.
Typowo w płynie mózgowo-rdzeniowym oznacza się całkowitą liczbę komórek, zróżnicowaną liczbę komórek i poziom białka. Poziom glukozy jest uzyskiwany sporadycznie i wynosi zwykle 60-80% poziomu glukozy we krwi. W przypadku podejrzenia choroby zakaźnej można wykonać posiew, serologię lub PCR. W przypadku chłoniaka do potwierdzenia rozpoznania można zastosować cytometrię przepływową lub PARR.
Kolor i przejrzystość
Normalny płyn mózgowo-rdzeniowy jest przezroczysty, bezbarwny i ma konsystencję wody.
Krwotok w płynie mózgowo-rdzeniowym, który wystąpił minimum 10 godzin przed pobraniem, może spowodować ksantochromię – żółto-pomarańczowe zabarwienie, spowodowane bilirubiną pochodzącą z metabolizowanych erytrocytów. Przebarwienie to może utrzymywać się do 2-4 tygodni po krwotoku do przestrzeni podpajęczynówkowej, ale zwykle ustępuje w ciągu 4-8 dni. Inną przyczyną ksantochromii może być ciężka żółtaczka lub znacznie podwyższony poziom białka w płynie mózgowo-rdzeniowym.
Zanieczyszczenie krwią powodujące czerwone zabarwienie płynu mózgowo-rdzeniowego może być jatrogenne lub spowodowane krwotokiem do przestrzeni podpajęczynówkowej. Aby w prosty sposób odróżnić krwotok jatrogenny od patologicznego, można odwirować część próbki. Ksantochromowy supernatant świadczy o krwotoku patologicznym, natomiast bezbarwny sugeruje zanieczyszczenie jatrogenne. Patologiczny krwotok można również podejrzewać, gdy w badaniu mikroskopowym obserwuje się erytrofagię, hemosiderofagi lub kryształy hematoidyn.
Mętny płyn mózgowo-rdzeniowy może być spowodowany znacznie zwiększoną liczbą komórek (> 500 WBC/µl) lub zwiększonym poziomem białka, co również spowoduje, że płyn będzie bardziej lepki.
Liczba komórek
Normalna liczba WBC w płynie mózgowo-rdzeniowym wynosi < 5 komórek/µl. W liczbie różnicowej powinny dominować komórki jednojądrowe (60-70% to małe limfocyty i 30-40% monocyty), a tylko sporadycznie stwierdza się dojrzałe neutrofile (< 1%, wyłączając zanieczyszczenie krwi). Podwyższenie liczby komórek jądrzastych w płynie mózgowo-rdzeniowym nazywane jest pleocytozą.
Większej liczby leukocytów można się spodziewać w przypadku chorób obejmujących opony mózgowe lub komórki nabłonkowe, ale nie koreluje to z ciężkością choroby ani rokowaniem. Głębokie zmiany miąższowe, zewnątrzoponowe i pozawłośniczkowe powodują minimalne lub żadne zmiany w płynie mózgowo-rdzeniowym lub tylko zwiększają stężenie białka.
Plejocytoza jednojądrzasta (mieszana) to zwiększona liczba leukocytów z przewagą limfocytów i makrofagów. Jest ona zazwyczaj związana z ziarniniakowym zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych (GME) u psów. Innymi przyczynami pleocytozy mieszanej są zakażenia grzybicze, pierwotniakowe i riketsjologiczne. Martwicze zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych (Pug/Maltańczyk, Yorkshire Terrier encephalitis) powoduje zazwyczaj głównie pleocytozę limfocytarną. Ten typ pleocytozy może być również widoczny w wirusowym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych (wścieklizna, nosówka psia) i chłoniakach w OUN.
Pleocytoza neutrofilowa jest często związana z infekcjami bakteryjnymi lub steroidoreaktywnym zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych. Rzadziej neutrofile mogą dominować w niektórych zakażeniach wirusowych (ostra nosówka u psów, FIP) lub grzybiczych, oponiakach i mielopatii zatorowo-zakrzepowej fibrokartylnej. W przypadku chorób zakaźnych neutrofile są częściej zdegenerowane niż w chorobach nieinfekcyjnych. U zwierząt z pleocytozą neutrofilową należy rozważyć wykonanie posiewu płynu mózgowo-rdzeniowego, szczególnie jeśli zwierzę wykazuje inne objawy sugerujące bakteryjne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych – gorączkę, neutrofilię obwodową i zdegenerowane neutrofile w płynie mózgowo-rdzeniowym.
Pleocytoza eozynofilowa jest rzadka i może być związana z nieprawidłową migracją pasożytów w OUN, zakażeniami pierwotniakami, kryptokokami i pierwotniakami, wścieklizną lub nosówką psów, lub rzadkim eozynofilowym zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych (reagującym na steroidy).
Normalny płyn mózgowo-rdzeniowy nie powinien zawierać erytrocytów, ale niska liczba jest często obserwowana z powodu jatrogennego zanieczyszczenia krwią. Zanieczyszczenie krwią może zakłócić interpretację liczby WBC i można zastosować formułę korekcyjną: każde 500 RBC/µl może odpowiadać 1 WBC/µl u psa, a każde 100 RBC/µl – 1 WBC/µl u kota; ale czasami nawet erytrocyty w ilości 15.000/µl nie wpływają znacząco na liczbę leukocytów.
Poziom białka
Normalne stężenie białka jest wyższe w okolicy lędźwiowej i ogólnie ma wartości < 45 mg/dl, w porównaniu z kranem cysternalnym, który zawiera < 25 mg/dl białka. Ponieważ stężenie białka w płynie mózgowo-rdzeniowym jest znacznie niższe niż w innych płynach ustrojowych, nie można go zmierzyć za pomocą refraktometru. Wpływ krwotoku na poziom białka jest zwykle niewielki – do zwiększenia stężenia białka o 1 mg/dl potrzeba około 1200 RBC/µl.
Prawidłowa liczba komórek przy podwyższonym poziomie białka to tzw. dysocjacja albuminocytologiczna. Występuje ona w chorobach, które zmieniają barierę krew-mózg i umożliwiają białku z krążenia przedostanie się do OUN, zwiększają produkcję białka w OUN lub utrudniają przepływ płynu w OUN (zewnątrzoponowa zmiana uciskowa jako IVDD, masa wewnątrzczaszkowa, uraz, zapalenie naczyń, martwica niedokrwienna OUN, mielopatia zwyrodnieniowa …).
LITERATURA:
Dewey C. W., Da Costa R. C.: Practical guide to Canine and Feline Neurology, 3rd Ed. Wiley Blackwell, 2016
Platt S. R., Olby N. J.: BSAVA Manual of Canine and Feline Neurology, 3rd Ed. BSAVA, 2004