Midianiter, in der hebräischen Bibel (Altes Testament), Mitglied einer Gruppe von Nomadenstämmen, die mit den Israeliten verwandt waren und wahrscheinlich östlich des Golfs von Akaba in den nordwestlichen Regionen der arabischen Wüste lebten. Sie betrieben Weidewirtschaft, Karawanenhandel und Banditentum, und ihre Hauptkontakte mit den Israeliten waren von der Zeit des Exodus (13. Jahrhundert v. Chr.) bis zur Zeit der Richter (12.-11. Jahrhundert v. Chr.). Nach dem Buch der Richter vertrieb der israelitische Häuptling Gideon die Midianiter in den Westen Palästinas, danach verschwanden sie weitgehend aus der biblischen Erzählung.
Nach dem Buch Genesis stammten die Midianiter von Midian ab, der der Sohn des hebräischen Patriarchen Abraham von dessen zweiter Frau Keturah war. Jethro, der priesterliche Anführer des midianitischen Unterstammes, der als Keniter bekannt war, und seine Tochter Zippora, die Ehefrau von Moses, beeinflussten das frühe hebräische Denken: Es war Jahwe, der Herr der Midianiter, der Moses als der Gott der Hebräer offenbart wurde.
Die Midianiter wurden traditionell als Ismaeliten identifiziert, zum Teil wegen einer unklaren Stelle in Genesis (37:28), die sich auf die Händler bezieht, an die Joseph von seinen Brüdern verkauft wurde, als sowohl Midianiter als auch Ismaeliten. Außerdem enthält die Geschichte von Gideon in Richter einen Vers (8,24), der eine offensichtliche Interpolation enthält, die die Midianiter als Ismaeliten identifiziert.