Sie wurde 1970 zur Miss South Dakota gekrönt und war anschließend Halbfinalistin bei der Wahl zur Miss America 1971.
Während sie zwei Jahre lang Englisch an der Washington High School unterrichtete, produzierte und moderierte sie außerdem ihre eigene Talkshow bei der damaligen NBC-Tochter KSFY-TV in Sioux Falls.
Hart begann ihre Vollzeit-Fernsehkarriere 1975 bei WMT-TV (heute KGAN) in Cedar Rapids, Iowa, und wechselte dann zu KMTV in Omaha, Nebraska. 1976 ging sie zu KTVY (heute KFOR-TV) in Oklahoma City, wo sie gemeinsam mit Danny Williams die Sendung Dannysday moderierte. Außerdem arbeitete sie als Handelsvertreterin für eine Schuljahrbuchfirma. Entschlossen, den Journalismus hinter sich zu lassen, zog sie 1979 mit 10.000 Dollar auf der Bank in den Stadtteil Westwood von Los Angeles. Hart landete eine kleine Rolle in der Seifenoper Days of Our Lives sowie einige TV-Werbespots. Fast ohne Geld wurde sie Co-Moderatorin bei der Los Angeles-Version des syndizierten PM Magazine. Das führte 1981 zu einem Job als Co-Moderatorin der ersten nationalen Talkshow von Regis Philbin auf NBC. Als diese Show vier Monate später abgesetzt wurde, interviewte Entertainment Tonight sie darüber, wie es sich anfühlt, abgesetzt zu werden. Am Tag nach dem Interview wurde sie als eine der Korrespondenten eingestellt. Dreizehn Wochen später wurde sie neben Ron Hendren zur Co-Moderatorin der Sendung ernannt.
Hendren wurde 1984 durch Robb Weller ersetzt, der 1986 durch John Tesh ersetzt wurde, der 1996 durch Bob Goen ersetzt wurde. Hart begann 2004 als Co-Moderatorin von ET mit Mark Steines. Bald nach ihrer Anstellung bei ET wählte Hart Jay Bernstein als ihren Manager.
Hart ist bekannt für ihre wohlgeformten Beine, was 1987 zu einem Werbevertrag mit Hanes für die Strumpfhosenlinie dieser Firma führte. Jay Bernstein ließ ihre Beine bei Lloyd’s of London für je eine Million Dollar versichern. Executive Producer Linda Bell Blue beschrieb Hart als „das Gesicht von ET“. Am 29. März 1987 nahm sie an der WrestleMania III der World Wrestling Federation teil und fungierte als Gastzeitnehmerin im Hauptkampf zwischen Hulk Hogan und André the Giant.
Im Sommer 1988 trat Hart in Las Vegas mit dem Komiker David Brenner im Golden Nugget Hotel und Casino auf, womit sie sich einen weiteren ihrer Kindheitsträume erfüllte: Sie sang und tanzte auf der Bühne. Sie setzte ihre Arbeit bei Entertainment Tonight fort, während sie in Las Vegas auftrat, und flog nach zwei Shows in Vegas, die letzte um 23:00 Uhr, zwischen den Städten hin und her, um am nächsten Morgen um 8:00 Uhr ET zu drehen. 1991 berichtete das New England Journal of Medicine, dass Harts Stimme bei einer Epileptikerin Anfälle ausgelöst hatte. Darauf wurde später in einer Episode von Tiny Toon Adventures und der NBC-Sitcom Seinfeld Bezug genommen, in der Kramer (Michael Richards) unter Krämpfen leidet, wenn er Harts Stimme hört. Hart wurde in Animaniacs in der Figur Mary Heartless parodiert. Sie verkörperte die Zeichentrickfigur Fairy Hart in einer Episode von The Fairly OddParents und in dem TV-Film Fairly OddBaby.
Im Mai 2009 erlitt Hart einen Bruch des linken Handgelenks aufgrund eines Unfalls zu Hause (nicht aufgrund einer exotischen Aktivität, trotz ihrer Witze darüber). Während ihr Handgelenk heilte, trug sie für jede Show verschiedene bunte Schlingen, die zu ihrer Garderobe passen oder diese ergänzen sollten. Am 5. August 2010 gab Hart bekannt, dass sie die Serie am Ende der 30. Staffel verlassen würde, da sie bereit für eine Veränderung sei. Harts letzte Folge wurde am 20. Mai 2011 ausgestrahlt und beendete ihre 29-jährige Geschichte mit dem Programm.
Zwischen 2014 und 2016 war Hart ein wiederkehrender Charakter in der ABC Family Sitcom Baby Daddy, als eine fiktive Version von sich selbst, die eine Morgenshow The Mary Hart Show moderiert und der Chef von Tahj Mowrys Charakter Tucker Dobbs ist.
Am 29. Oktober 2015 hatte Hart einen Gastauftritt bei ET, wo sie von der damaligen Moderatorin Nancy O’Dell interviewt wurde; ihr Auftritt sollte der Auftakt zu einer einmonatigen Feier der 35. Staffel der Sendung sein.
Hart war Master of Ceremonies bei der Feier zum 4. Juli am Mount Rushmore am 3. Juli 2020. In ihrer Ansprache sagte sie: „Ich erinnere mich gut an die Turbulenzen, den Tumult, die Tragödie, aber letztendlich auch an den Triumph der sechziger Jahre. Ich bin damals aufgewachsen, und das waren keine einfachen Zeiten – für diejenigen unter Ihnen, die wie ich alt genug sind, um sich zu erinnern – aber wissen Sie was, das war ein schreckliches Jahrzehnt, aber wir haben uns zu einer besseren Nation entwickelt.“