DNA抽出は、細胞の核からDNAを分離するために使用される日常的な手順です
科学者はすぐに使えるDNA抽出キットを購入することができます。 これらのキットは、特定の細胞タイプやサンプルタイプからDNAを抽出するのに役立ちます。 しかし、日常的に使用するにはコストがかかるため、多くの研究室では独自のDNA抽出方法を採用しています
DNA抽出には何が必要か
ステップ1. DNAを抽出するために細胞を破壊する
サンプル中の細胞は、多くの場合、粉砕やボルテックスなどの物理的手段によって互いに分離され、塩を含む溶液に入れられます。 塩に含まれるプラスの電荷を帯びたナトリウムイオンは、DNAの骨格に沿って存在するマイナスの電荷を帯びたリン酸基を保護するのに役立ちます。
その後、洗剤を加えます。
次に洗剤を加え、細胞膜や核の脂質を分解します。
ステップ2. タンパク質や他の細胞の残骸からDNAを分離する
DNAのきれいなサンプルを得るためには、できるだけ多くの細胞の残骸を取り除くことが必要です。 これにはさまざまな方法があります。 多くの場合、プロテアーゼ(タンパク質酵素)を加えて、DNAに関連するタンパク質やその他の細胞タンパク質を分解します。
ステップ3. アルコールでDNAを沈殿させる
最後に、氷で冷やしたアルコール(エタノールまたはイソプロパノール)をDNAサンプルに注意深く加えます。 DNAは水には溶けますが、塩とアルコールの存在下では溶けません。 滅菌したピペットでアルコール層を静かにかき混ぜると、沈殿物が見えてくるので、これを巻き取ることができます。 DNAの量が多い場合は、糸状の白い沈殿物が見られることがあります。 DNAの洗浄
DNAサンプルは、さらに精製(洗浄)することができます。
ステップ5.
DNAの存在と品質の確認
さらなる実験のためには、DNAの濃度と品質を知ることが重要です。
分光光度計による光学的密度の測定は、サンプル中のDNAの濃度と純度を決定するために使用することができます。
分光光度計で光学密度を測定すると、サンプル中のDNAの濃度と純度がわかります。また、ゲル電気泳動を行うと、サンプル中のDNAの存在と品質がわかります。
このDNAは何に使用できますか
抽出されたDNAは、PCR、電気泳動、シーケンス、フィンガープリント、クローニングなどの分子分析に使用できます。