L’asse y di uno spettro di massa rappresenta l’intensità del segnale degli ioni. Quando si usano rivelatori a conteggio l’intensità è spesso misurata in conteggi al secondo (cps). Quando si usa l’elettronica di rilevamento analogico, l’intensità è tipicamente misurata in volt. In FTICR e Orbitraps il segnale nel dominio della frequenza (l’asse y) è legato alla potenza (~ampiezza al quadrato) dell’onda sinusoidale del segnale (spesso ridotta a una potenza rms); tuttavia, l’asse non è solitamente etichettato come tale per molte ragioni. Nella maggior parte delle forme di spettrometria di massa, l’intensità della corrente ionica misurata dallo spettrometro non rappresenta accuratamente l’abbondanza relativa, ma si correla vagamente con essa. Pertanto, è comune etichettare l’asse y con “unità arbitrarie”.
Asse Y e abbondanza relativaModifica
L’intensità del segnale può dipendere da molti fattori, specialmente dalla natura delle molecole analizzate e da come si ionizzano. L’efficienza della ionizzazione varia da molecola a molecola e da sorgente ionica a sorgente ionica. Per esempio, nelle sorgenti elettrospray in modalità di ionizzazione positiva, un’ammina quaternaria si ionizzerà eccezionalmente bene, mentre un grande alcool idrofobico molto probabilmente non sarà visto, non importa quanto concentrato. In una sorgente EI queste molecole si comporteranno in modo molto diverso. Inoltre ci possono essere fattori che influenzano la trasmissione degli ioni in modo sproporzionato tra la ionizzazione e la rilevazione.
Sul lato della rilevazione ci sono molti fattori che possono anche influenzare l’intensità del segnale in modo non proporzionale. La dimensione dello ione influenzerà la velocità di impatto e con alcuni rivelatori la velocità è proporzionale all’uscita del segnale. In altri sistemi di rilevazione, come la FTICR, il numero di cariche sullo ione è più importante per l’intensità del segnale. Nella risonanza a ciclotrone ionico a trasformata di Fourier e negli spettrometri di massa del tipo Orbitrap, l’intensità del segnale (asse Y) è legata all’ampiezza del segnale di decadimento dell’induzione libera. Si tratta fondamentalmente di una relazione di potenza (ampiezza al quadrato), ma spesso calcolata come un . Per i segnali di decadimento il valore efficace non è uguale all’ampiezza media. Inoltre la costante di smorzamento (tasso di decadimento del segnale nella fedeltà) non è la stessa per tutti gli ioni. Per trarre conclusioni sull’intensità relativa è necessaria una grande conoscenza e attenzione.
Un modo comune per ottenere più informazioni quantitative da uno spettro di massa è quello di creare una curva standard con cui confrontare il campione. Questo richiede la conoscenza di ciò che deve essere quantitativo in anticipo, la disponibilità di uno standard e la progettazione dell’esperimento specificamente per questo scopo. Una variante più avanzata è l’uso di uno standard interno che si comporta in modo molto simile all’analita. Questo è spesso una versione dell’analita marcata isotopicamente. Ci sono forme di spettrometria di massa, come la spettrometria di massa con acceleratore che sono progettate dal basso verso l’alto per essere quantitative.
Spectral skewingEdit
Spectral skewing è il cambiamento di intensità relativa dei picchi dello spettro di massa a causa dei cambiamenti nella concentrazione dell’analita nella sorgente ionica mentre lo spettro di massa viene scansionato. Questa situazione si verifica di routine quando i componenti cromatografici eluiscono in una sorgente ionica continua. Lo skewing spettrale non si osserva negli analizzatori di massa a trappola ionica (quadrupolo (è stato visto anche nei QMS) o magnetici) o a tempo di volo (TOF) perché potenzialmente tutti gli ioni formati nel ciclo operativo (un’istantanea nel tempo) dello strumento sono disponibili per la rilevazione.