È stata incoronata Miss South Dakota 1970 e successivamente è stata semifinalista al concorso di Miss America 1971.
Mentre insegnava inglese alla Washington High School per due anni, ha anche prodotto e condotto il suo talk show sull’allora affiliata della NBC KSFY-TV a Sioux Falls.
Hart ha iniziato la sua carriera televisiva a tempo pieno nel 1975 a WMT-TV (attualmente KGAN) a Cedar Rapids, Iowa, passando poi a KMTV a Omaha, Nebraska. Nel 1976, è andata a KTVY (ora KFOR-TV) a Oklahoma City, dove, con Danny Williams, ha co-condotto lo show Dannysday. Era anche rappresentante per una società di annuari scolastici. Decisa a lasciarsi il giornalismo alle spalle, si trasferì nel quartiere losangelino di Westwood nel 1979 con 10.000 dollari in banca. Hart ottenne un piccolo ruolo nella soap opera Days of Our Lives e alcuni spot televisivi. Quasi senza soldi, divenne una co-conduttrice della versione di Los Angeles della rivista sindacale PM. Questo portò ad un lavoro nel 1981 come co-conduttrice del primo talk show nazionale di Regis Philbin sulla NBC. Quando quello show fu cancellato quattro mesi dopo, Entertainment Tonight la intervistò su come ci si sentiva ad essere cancellati. Il giorno dopo l’intervista, è stata assunta come uno dei suoi corrispondenti. Tredici settimane dopo, fu nominata co-conduttrice dello show, insieme a Ron Hendren.
Nel 1984, Hendren fu sostituito da Robb Weller, che fu sostituito da John Tesh nel 1986, che fu sostituito da Bob Goen nel 1996. Hart ha iniziato a co-condurre ET con Mark Steines nel 2004. Poco dopo la sua assunzione da ET, la Hart ha scelto Jay Bernstein come suo manager.
Hart è nota per le sue gambe formose, che l’hanno portata ad avere un contratto di sponsorizzazione con Hanes per la linea di collant di quell’azienda nel 1987. Jay Bernstein fece assicurare le sue gambe con i Lloyd’s di Londra per 1 milione di dollari ciascuna. La produttrice esecutiva Linda Bell Blue descrisse la Hart come “il volto di ET”. Il 29 marzo 1987 partecipò alla WrestleMania III della World Wrestling Federation, servendo come cronometrista ospite nell’evento principale tra Hulk Hogan e André the Giant.
Durante l’estate del 1988, la Hart apparve a Las Vegas con il comico David Brenner al Golden Nugget Hotel and Casino, che realizzò un altro dei suoi sogni d’infanzia, cantare e ballare sul palco. Ha continuato il suo lavoro su Entertainment Tonight mentre si esibiva a Las Vegas, volando tra le città dopo due spettacoli a Las Vegas, l’ultimo alle 23:00, per filmare ET la mattina seguente alle 8:00. Nel 1991, il New England Journal of Medicine riportò che la voce della Hart aveva scatenato delle crisi in una donna epilettica. Questo è stato successivamente riferito in un episodio di Tiny Toon Adventures e nella sitcom della NBC Seinfeld, dove Kramer (Michael Richards) soffre di convulsioni ogni volta che sente la voce di Hart. Hart è stata parodiata in Animaniacs nel personaggio Mary Heartless. Ha doppiato il personaggio dei cartoni animati Fairy Hart in un episodio di The Fairly OddParents e nel film TV The Fairly Oddparents, Fairly OddBaby.
Nel maggio 2009, la Hart ha subito la rottura del polso sinistro a causa di un incidente in casa (non dovuto a qualche attività esotica, nonostante le sue battute al riguardo). Mentre il suo polso stava guarendo, ha indossato varie imbragature dai colori vivaci, progettate per abbinare o completare il suo guardaroba per ogni spettacolo. Il 5 agosto 2010, Hart ha annunciato che stava lasciando lo spettacolo alla fine della prossima stagione 30, citando che era pronta per un cambiamento. L’ultimo episodio della Hart è andato in onda il 20 maggio 2011, concludendo la sua storia di 29 anni con il programma.
Tra il 2014 e il 2016, la Hart è stata un personaggio ricorrente nella sitcom della ABC Family Baby Daddy, nel ruolo di una versione fittizia di se stessa che conduce uno show mattutino The Mary Hart Show ed è il capo del personaggio di Tahj Mowry, Tucker Dobbs.
Il 29 ottobre 2015, Hart ha fatto un’apparizione su ET, intervistata dall’allora conduttrice Nancy O’Dell; la sua apparizione doveva dare il via a un mese di celebrazioni per la 35esima stagione del programma.
Hart è stata Maestro di Cerimonie alla celebrazione del 4 luglio al Monte Rushmore il 3 luglio 2020. Nelle sue osservazioni, ha detto: “Ricordo bene la tumultuosità, il tumulto, la tragedia, ma alla fine il trionfo degli anni sessanta. Stavo crescendo allora, e quelli non erano tempi facili – per quelli di voi che sono abbastanza vecchi come me, per ricordare – ma sapete cosa, quello è stato un decennio terribile, ma siamo diventati una nazione migliore.”