L’analisi del CSF è un importante strumento diagnostico nell’indagine dei pazienti neurologici, ma ha dei limiti. Il conteggio delle cellule e il livello di proteine del CSF possono essere pensati come un analogo del CNS dell’emocromo e del livello di proteine del siero. Anomalie nel colore, nella cellularità e nel livello proteico del CSF sono fortemente indicative di una malattia neurologica e spesso contribuiscono alla diagnosi, ma sono aspecifiche e solo occasionalmente forniscono una diagnosi definitiva da sole. Le malattie del SNC inoltre non sempre causano alterazioni nel CSF – le anomalie dipendono dalla localizzazione e dall’estensione della lesione. Un precedente trattamento con corticosteroidi può interferire con il CSF e ridurre la conta dei globuli bianchi e la percentuale di neutrofili. Il CSF dovrebbe idealmente essere processato (o conservato) entro 30 minuti dalla raccolta perché le cellule si deteriorano rapidamente a causa dello scarso contenuto proteico.
La raccolta del CSF dovrebbe essere eseguita prima della mielografia, poiché i mezzi di contrasto possono indurre irritazione meningea e cambiare il carattere del liquido producendo una risposta infiammatoria. I cambiamenti possono influenzare l’analisi del CSF per almeno tre o cinque giorni dopo la mielografia.
In genere, nel CSF vengono determinati la conta cellulare totale, la conta cellulare differenziale e il livello di proteine. Un livello di glucosio è occasionalmente ottenuto ed è normalmente il 60-80% del livello di glucosio nel sangue. Quando si sospetta una malattia infettiva, si possono eseguire colture, sierologia o PCR. In caso di linfoma, la citometria a flusso o la PARR possono essere utilizzate per confermare la diagnosi.
Colore e chiarezza
Il CSF normale è trasparente, incolore e di consistenza acquosa.
Un’emorragia nel CSF, che si verifica un minimo di 10 ore prima della raccolta può provocare xantocromia – colorazione giallo-arancio, causata dalla bilirubina degli eritrociti metabolizzati. Questa colorazione può persistere fino a 2-4 settimane dopo l’emorragia nello spazio subaracnoideo, ma di solito si risolve in 4-8 giorni. Altre cause di xantocromia possono essere l’ittero grave o i livelli proteici del CSF marcatamente elevati.
La contaminazione del sangue con conseguente CSF di colore rosso può essere iatrogena o dovuta all’emorragia nello spazio subaracnoideo. Per differenziare semplicemente l’emorragia iatrogena da quella patologica, una parte del campione può essere centrifugata. Un surnatante xantocromico è indicativo di un’emorragia patologica, mentre uno incolore suggerisce una contaminazione iatrogena. Si può sospettare un’emorragia patologica anche quando durante l’esame microscopico si osservano eritrofagia, emosiderofagi o cristalli di ematoidina.
Il liquor torbido può essere dovuto a un numero marcatamente elevato di cellule (> 500 WBCs/µl) o a un aumento dei livelli di proteine, che causerà anche una maggiore viscosità del fluido.
Conteggio delle cellule
Il conteggio normale dei WBC nel CSF è < 5 cellule/µl. Nella conta differenziale, le cellule mononucleate dovrebbero predominare (60-70% di esse sono piccoli linfociti e 30-40% monociti) e solo occasionalmente si trovano neutrofili maturi (< 1%, esclusa la contaminazione del sangue). L’elevazione delle cellule nucleate nel CSF è chiamata pleocitosi.
Un numero maggiore di leucociti è previsto con malattie che coinvolgono le meningi o le cellule ependimali, ma questo non è correlato con la gravità della malattia o la prognosi. Le lesioni parenchimali profonde, extradurali e non esfoliative causano un cambiamento minimo o nullo nel CSF o solo un aumento dei livelli di proteine.
La pleocitosi cellulare mononucleare (mista) è un aumento dei leucociti con una predominanza di linfociti e macrofagi. Di solito è associata alla meningoencefalite granulomatosa (GME) nei cani. Altre cause di pleocitosi cellulare mista sono le infezioni fungine, protozoarie e rickettsiali. La meningoencefalite necrotizzante (carlino/maltese, encefalite dello Yorkshire Terrier) di solito causa principalmente pleocitosi linfocitaria. Questo tipo di pleocitosi può essere visto anche nella meningite virale (rabbia, cimurro canino) e nel linfoma del SNC.
Una pleocitosi neutrofila è spesso associata a infezioni batteriche o a meningiti steroido-responsive. Meno comunemente i neutrofili possono predominare in alcune infezioni virali (cimurro canino acuto, FIP) o fungine, meningiomi e mielopatia embolica fibrocartilaginea. Nei casi di malattie infettive, è più probabile che i neutrofili siano degenerati che nei disturbi non infettivi. La coltura del CSF dovrebbe essere considerata in animali con pleocitosi neutrofila, specialmente se l’animale mostra altri segni suggestivi di meningite batterica – piressia, neutrofilia periferica e neutrofili degenerati nel CSF.
La pleocitosi eosinofila è rara e può essere associata a migrazione aberrante di parassiti nel SNC, infezioni protozoarie, criptococciche e prototeche, rabbia o cimurro canino, o rara meningoencefalite eosinofila (steroido-responsiva).
Il CSF normale non dovrebbe contenere eritrociti, ma un basso numero è comunemente visto a causa di contaminazione iatrogena del sangue. La contaminazione del sangue può interferire con l’interpretazione della conta dei WBC e si può usare una formula di correzione: ogni 500 RBCs/µl può rappresentare 1 WBC/µl in un cane e ogni 100 RBCs/µl per 1 WBC/µl in un gatto; ma a volte anche gli eritrociti fino a 15.000/µl non influenzano significativamente la conta dei leucociti.
Livello proteico
La concentrazione proteica normale è più alta nella regione lombare e generalmente ha valori < 45 mg/dl, rispetto al rubinetto cisternale che contiene < 25 mg/dl di proteine. Poiché la concentrazione di proteine nel CSF è molto più bassa che in altri fluidi corporei, non può essere misurata con il rifrattometro. L’effetto dell’emorragia sul livello di proteine è solitamente basso – circa 1200 RBCs/µl sono necessari per aumentare la concentrazione di proteine di 1 mg/dl.
Un conteggio cellulare normale con un livello di proteine elevato è chiamato dissociazione albuminocitologica. Si verifica con malattie che alterano la barriera emato-encefalica e permettono alle proteine della circolazione di entrare nel SNC, aumentano la produzione di proteine all’interno del SNC o ostruiscono il flusso di liquido nel SNC (lesione compressiva extradurale come IVDD, massa intramidollare, trauma, vasculite, necrosi ischemica del SNC, mielopatia degenerativa…).
LITERATURA:
Dewey C. W., Da Costa R. C.: Guida pratica alla neurologia canina e felina, 3rd Ed. Wiley Blackwell, 2016
Platt S. R., Olby N. J.: BSAVA Manual of Canine and Feline Neurology, 3rd Ed. BSAVA, 2004